营养素是幼龄动物进行新陈代谢的物质基础,只有满足生长发育的需要,动物才能平稳的进行各项生命活动,营养不足或过量均会影响动物正常的生理机能[1-2]。近年来,针对湖羊的研究逐渐增多,但大多集中在开食料补饲时间[3]、断母乳日龄[4]、蛋白质水平[5]、蛋白质及能量水平[6]和能量水平[7]的研究上,有关日粮脂肪方面的研究较少。日粮脂肪不仅影响能量供给,适当的脂肪水平可以减少腹泻,并且与羔羊的胃肠道发育以及营养物质消化具有密切关系[8]。
本试验以双胞胎湖羊公羔为研究对象,尽可能消除遗传因素的影响,以期准确的研究高脂肪日粮对羔羊生长发育、腹泻率以及血清学指标的影响。
1 材料与方法 1.1 试验时间及地点试验于2016年8月25日-2017年1月9日在江苏省泰州市姜堰区海伦羊业有限公司进行。
1.2 试验方法选取初生重((2.21±0.11)kg)和7日龄体重((4.22±0.56)kg)相近且日龄相同、健康无病的湖羊双胞胎公羔30对。试验采用配对试验设计,分为正常脂肪组(Normal fat: NF)和高脂肪组(High fat: HF),每对双胞胎随机分到两个组中。羔羊在0~7日龄均随母哺乳,7~60日龄人工饲喂代乳品,NF组饲喂脂肪水平为15%的代乳品和2.8%的开食料,HF组开始饲喂脂肪水平为27%的代乳品及5.0%的开食料,开食料15日龄开始补饲且自由采食。60日龄断代乳品,60~120日龄统一饲喂脂肪含量为2.8%的开食料(unified starter: US)。试验共进行120 d。
1.3 试验日粮代乳品NF组和开食料脂肪水平设定分别参照我国发明专利ZL201210365927.6[9]和NRC(2007)[10]及本团队已有的研究结果[5-6],代乳品HF组根据贾宇[11]测定的羊乳中脂肪成分,并结合实际生产情况而定。两组代乳粉蛋白水平一致,但HF组脂肪水平是NF组的1.8倍(实测值,NF组DM为94.77%,CP为23.12%,EE为15.15%,GE为19.57%;HF组DM为95.04%, CP为23.53%,EE为26.89%,GE为21.77%)。NF组代乳粉脂肪来源于乳脂,HF组代乳粉在NF组的基础上添加1:1的椰子油和棕榈油。试验期间开食料的组成成分及营养水平见表 1。
准备试验期间用生石灰及聚维酮碘消毒液将羊舍全面消毒两遍,试验羔羊每个重复一个栏位,每个重复3只羊,每只羊的活动空间3 m2,每周对所有栏位进行消毒一次,所有羔羊均进行正常的免疫程序且饲养管理方式相同。
试验羔羊7日龄断母乳进行人工饲喂代乳品,7~50日龄,按体重的2%进行饲喂,50~60日龄按体重的1.5%饲喂,每10 d按羔羊体重调整一次代乳品饲喂量,每天饲喂3次(06:00,12:00,17:30)。代乳品的饲喂要求:(1)冲泡水温-使用沸水冷却至50~60℃冲泡代乳品;(2)饲喂温度-冲泡后搅拌均匀冷却至(38±2)℃进行饲喂;(3)冲泡比例-7~50日龄代乳品与水的比例为1:6,50~60日龄冲泡比例为1:7;(4)消毒-每次饲喂后奶瓶及奶嘴清洗干净并用开水浸泡消毒;(5)饲喂后处理-每次饲喂代乳品后用干净的湿毛巾擦净羔羊嘴周。整个试验周期羔羊自由饮水,冬天饲喂温开水。记录每天的采食量并观察和记录腹泻情况。
1.5 样品采集、测定指标及方法 1.5.1 试验日粮营养成分及含量代乳品及开食料中营养成分的测定方法:总能测定使用Parr-6400氧弹式热量仪测定,粗蛋白含量采用KjeltecTMSampler 8420全自动凯氏定氮仪(FOSS)测定;代乳品脂肪水平采用GB/T5413.3-2010婴幼儿配方食品和乳品脂肪的测定方法[12],开食料脂肪水平采用ANKOMXT15全自动脂肪仪测定;干物质、粗灰分、钙和磷含量参照《饲料分析及饲料质量检测技术》[13]测定。
1.5.2 生长性能体重:准确称量试验羔羊的初生重,7、20、30、40、50、60、90、120日龄晨饲前称量体重。每天记录开食料的投放量与剩料量,根据各阶段的始末体重值计算日增重。
采食量:每天精确记录开食料采食量及剩料量,用于计算羔羊的开食料采食量,代乳品的饲喂量根据7日龄体重及之后每10 d的体重调整1次,并记录代乳品采食量。
饲料转化率(F/G):根据增重及采食量计算各阶段的饲料转化率。
体尺:用牛羊身高测量仪测定试验羔羊的体斜长、胸宽、胸深,用卷尺测量体高、胸围以及管围。
腹泻率:试验期间每天观察羔羊5次,若5次中有3次腹泻(羔羊排出的粪便稀软或呈水样,尾根被粪便污染时,认为腹泻[14]),则判定该羔羊该天腹泻。腹泻率=腹泻天数/(试验只数×试验期)×100%。
1.5.3 血清学常规指标羔羊60、90及120日龄,晨饲前分别对每个处理的9只羔羊通过颈静脉采血,3 000 r·min-1离心15 min,分装于1.5 mL离心管中,-20 ℃保存用于检测血清学指标。使用L-3180半自动生化分析仪测定血糖(GLU)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)含量。
1.6 数据处理试验数据经过Excel 2016初步整理后,使用SAS9.4统计软件Paired T-test配对T检验,以P < 0.05作为判断差异显著性的标准,0.05 < P < 0.10作为显著性趋势判断标准。
2 结果 2.1 日粮脂肪水平对湖羊双胞胎公羔生长性能的影响 2.1.1 日粮脂肪水平对湖羊双胞胎公羔羊体重的影响由表 2可知,NF组和HF组羔羊7日龄体重(初始体重)差异不显著(P>0.05)。在断代乳品前,饲喂不同脂肪水平的日粮。30及50日龄时,HF组体重显著高于NF组(P < 0.05),而60日龄时,HF组羔羊平均体重有显著高于NF组的趋势(0.05 < P < 0.10);在7~60日龄阶段,两组平均日增重差异不显著(P>0.05)。60日龄断代乳品,之后两组羔羊饲喂相同饲料,90及120日龄时,HF组羔羊平均体重显著高于NF组(P < 0.05);60~90 d阶段,HF组羔羊平均日增重显著高于NF组(P < 0.05),而在90~120及60~120日龄阶段HF组与NF组平均日增重差异不显著(P>0.05),但在整个试验期间(7~120日龄阶段),HF组羔羊平均日增重有显著超过NF组的趋势(0.05 < P < 0.10)。
由表 3可知,7~60日龄阶段,两组羔羊采食不同脂肪水平的日粮,HF组代乳品采食量显著高于NF组(P < 0.05),而开食料采食量则差异不显著(P>0.05),这一阶段的饲料转化率差异不显著(P>0.05)。在断代乳品后,饲喂相同日粮情况下,60~90日龄阶段,HF组羔羊开食料采食量显著高于NF组(P < 0.05),而HF组饲料转化率显著低于NF组(P < 0.05);在90~120日龄阶段,HF组开食料采食量显著高于NF组(P < 0.05),且饲料转化率有显著高于NF组的趋势(0.05 < P < 0.10);在60~120日龄阶段,HF组开食料采食量显著高于NF组(P < 0.05),这一阶段的饲料转化率差异不显著(P>0.05)。而整个试验周期,HF组总平均采食量显著高于NF组(P < 0.05),总体饲料转化率差异不显著(P>0.05)。
由表 4可知,试验初始时(7日龄),NF组和HF组羔羊的体斜长、胸宽、胸深、体高、胸围和管围均无显著差异(P>0.05)。在断奶前,饲喂不同脂肪水平的日粮,30日龄时,HF组羔羊的体斜长有高于NF组的趋势(0.05 < P < 0.10),但HF组羔羊胸深显著低于NF组(P < 0.05),其他体尺指标均无显著差异(P>0.05);在60日龄时,HF组羔羊的体斜长有显著高于NF组的趋势(0.05 < P < 0.10),且HF组羔羊胸围显著高于NF组(P < 0.05),其他体尺指标差异不显著(P>0.05)。在断代乳品后,60~120日龄阶段,所有试验羔羊饲喂相同饲料,90日龄时,HF组羔羊的胸围、胸宽及胸深均显著高于NF组(P < 0.05),其他体尺指标差异不显著(P>0.05);在120日龄时,NF组和HF组羔羊的体斜长、胸宽、胸深、体高及管围均无显著差异(P>0.05),HF组羔羊的胸围显著高于NF组(P < 0.05)。
由表 5可见,7~20日龄阶段,HF组羔羊腹泻率有显著低于NF组的趋势(0.05 < P < 0.10),而在20~30、30~40、40~50及50~60日龄阶段两组羔羊腹泻率无显著差异(P>0.05),而试验开始至断代乳品前(7~60日龄),HF组羔羊腹泻率有显著低于NF组的趋势(0.05 < P < 0.10)。
由表 6可知,在60日龄时,HF组羔羊血清中ALB水平显著高于NF组(P < 0.05),HF组GLU、TC、TG、HDL、LDL、TP及IgG水平均高于NF组,但差异不显著(P>0.05);在90日龄时,两组羔羊血清中GLU、TG、HDL、LDL、TP、ALB及IgG含量均差异不显著(P>0.05),但HF组羔羊血清中TC含量有显著低于NF组的趋势(0.05 < P < 0.10);在120日龄时,两组羔羊血清常规指标均差异不显著(P>0.05)。
研究表明,人工饲喂代乳品可以达到母乳饲喂相同的效果[15],但断奶后的营养水平如能量、蛋白和脂肪[5, 7-8, 16-17]水平会显著影响幼龄动物的生长发育。脂肪是主要的供能物质,其能值是等量碳水化合物的2.25倍[18]。适当的脂肪水平可以促进动物的生长发育、提高生产力、减少腹泻等[19-21]。脂肪是动物体组织的主要成分,且其生物学价值和能量价值高,因此,脂肪在动物配方中占有极其重要的地位。
3.1.1 日粮脂肪水平对双胞胎公羔体重的影响20世纪初期,国外对于脂肪在犊牛上的研究较多[22-23],但存在着很大的争议。近年来,G.Araujo等[24]对犊牛饲喂等量代乳品、开食料脂肪水平不同的情况下(4 L·d-1,6 L·d-1),饲喂代乳品(6 L·d-1)、高脂肪开食料组的生长性能最佳。陈代文等[25]在猪上的研究表明,添加不同种类脂肪,猪的生长性能均优于对照组。但对于代乳品和开食料整体水平在湖羊双胞胎公羔上的研究尚未报道。本试验中,羔羊初生重和7日龄重无显著差异,排除了初始体重引起的差异。在7~60日龄阶段,两组羔羊饲喂不同脂肪水平日粮,随着日龄的增加,30及50日龄时,HF组羔羊体重显著高于NF组(P < 0.05),而60日龄时,HF组有显著高于NF组的趋势(0.05 <P < 0.10),这说明高脂肪水平的日粮在断乳品前能促进羔羊的生长,这与刘忠臣等[26]日粮添加脂肪促进仔猪生长的结果一致。断代乳品时,两组羔羊体重表现有显著差异的趋势,可能的原因是,在50日龄将代乳粉饲喂量由羔羊体重的2%调整到1.5%,且代乳粉的冲泡比例由1:6调整到1:7,对HF组羔羊造成的应激较大。断代乳品后两组饲喂相同日粮,在90日龄时,HF组平均体重显著高于NF组(P < 0.05),且60~90日龄阶段,HF组平均日增重显著高于NF组(P < 0.05),说明在断代乳品后,前期饲喂高脂肪日粮的HF组羔羊生长速度仍然较快。而在120日龄时,HF组平均体重显著高于NF组(P < 0.05),但在90~120日龄时平均日增重没有显著差异(P>0.05),这与陈代文等[25]、郑荷花等[27]研究日粮中添加脂肪可以提高仔猪增重的结果一致。但从断奶后整体结果看,虽然前期饲喂高脂肪日粮的HF组羔羊在平均体重上高于NF组,但在90~120日龄阶段增重的幅度已经低于NF组,也从另一角度说明随着羔羊的快速生长,断奶前高脂肪日粮对羔羊生长的促进作用逐渐降低。
3.1.2 日粮脂肪水平对双胞胎公羔采食量及饲料转化率的影响日粮中适宜的脂肪水平可以改善其适口性,从而提高采食量。本试验中,在断代乳品前,两组羔羊饲喂不同脂肪水平的日粮,HF组代乳品采食量显著高于NF组(P < 0.05),但开食料的采食量HF组低于NF组,这与C. S. Kuehn等[22]研究结果相似,高脂代乳品在一定程度上会抑制开食料的采食,这也可能是两组羔羊在60日龄时体重没有显著差异的原因之一,而这一阶段的饲料转化率两组差异不显著(P>0.05)。在断代乳品后,60~90、90~120、60~120及7~120日龄阶段,HF组采食量显著高于NF组(P <0.05),这与体重的增长指标对应,也说明了断奶期饲喂高脂日粮能提高断奶后羔羊的采食量,这与G.Araujo等[24]的研究结果相似。这可能是由于椰子油和棕榈油含有较高的中链脂肪酸,对于断奶前的免疫功能建立有促进作用[26],从而促进断奶后的生长。对于饲料转化率,60~90日龄阶段,HF组显著低于NF组(P <0.05),这与郑荷花等[27]得出添加脂肪降低饲料转化率的结论一致。而其他阶段差异不显著,这也说明高脂肪日粮处理对后期有改善饲料转化率的效果,但这一效果不是一直持续的。而J.N.Tikofsky等[28]对荷斯坦公犊牛饲喂不同脂肪和碳水化合物,得出脂肪对饲料转化率无显著影响的结论,这可能与动物种类、脂肪种类以及试验环境等有关。
3.1.3 日粮脂肪水平对双胞胎公羔体尺性状的影响体尺性状是动物最直观的生产指标,体尺的测量主要目的在于了解动物各部位发育情况。本试验结果显示,在30日龄时,NF组的胸深显著大于HF组(P <0.05),这可能是由于30日龄前,HF组高脂日粮对羔羊的应激较大,对骨骼等发育产生了不利影响。而随着日龄的增长,在60日龄时,HF组的胸围显著大于NF组(P <0.05),说明从长远来看,饲喂高脂肪日粮能刺激瘤胃发育,促进羔羊的快速生长,这与在90及120日龄时,HF组羔羊的胸围显著高于NF组(P <0.05)相对应,本试验结果与S. R. Fernandes等[29]和R. C. Waterman等[30]在饲喂代乳品及随母哺乳的对比试验结果相似,且本研究结果中胸围指标更明显,也表明了日粮高脂肪水平对体尺性状的影响可持续到4月龄。
3.2 日粮脂肪水平对湖羊双胞胎公羔断奶前腹泻率的影响腹泻是多种因素引起的肠道疾病,在反刍动物幼龄阶段,除致病菌外,天气变化、饲养管理不当等均会导致腹泻。本试验数据显示,7~40日龄阶段随着日龄增加腹泻率升高,可能原因是试验场地所在区域长期下雨导致腹泻率升高,羔羊出生至7日龄为初乳和母乳喂养,获得被动免疫,7~40日龄处在免疫建立和完善阶段,这一阶段存在不确定性,而下雨引起的温度变化也是羔羊腹泻的直接原因。在30~40日龄时,两组羔羊的腹泻率都是最高的,说明羔羊在这个时期,胃肠道的机能相对脆弱,需要格外注意。7~20日龄,NF组的腹泻率有显著超过HF组的趋势(0.05 < P < 0.10),这说明一定程度的高脂肪日粮可能缓解从母乳到代乳粉过渡的应激。从断奶前的整个阶段来看,NF组的腹泻率有显著高于HF组的趋势(0.05 < P < 0.10),这也说明在本试验条件下,高脂肪日粮可以减少腹泻的发生,这与陈琨飞[31]在仔猪上的研究以及T. M. Hill等[32]在犊牛上的研究结果一致,这应该与高脂肪组的椰子油和棕榈油中中链脂肪酸有完善免疫功能的作用有关[33],但由于本试验中未采集断奶前各日龄血清,具体机制需要进一步试验。
3.3 日粮脂肪水平对湖羊双胞胎公羔血清生化指标的影响羔羊的血清生化指标能综合反映机体的新陈代谢情况,也是羔羊健康状况的直接表现。TP、ALB浓度可以反映日粮蛋白水平及羔羊对蛋白质的消化吸收能力,本试验中,在60日龄时血液中TP及ALB水平HF组均高于NF组,且白蛋白水平达到差异显著的水平,这与邓波等[34-35]在仔猪上的研究结果一致。90日龄时HF组TP和ALB含量仍高于NF组,而在120日龄HF组低于NF组,但差异不显著(P>0.05)。而对于HF组,随着日龄的增长,GLU、TC、HDL、LDL含量逐渐增加,而HF组,则呈现先下降后上升的规律;而对于TP、ALB、IGG,两组随着日龄的增加含量也增加;TG含量随着日龄的增加为NF组先上升后下降,HF组则相反,但这些变化均在动物健康的范围内,这也说明了断奶前饲喂高脂日粮会影响血清指标的变化,但均在动物的正常调节范围内。
4 结论在本试验条件下,断奶前高脂肪日粮能促进湖羊双胞胎公羔的生长,主要表现在采食量与体重方面,且这种促进作用可以持续到4月龄;高脂日粮对羔羊体尺指标无显著影响,但在一定程度上可降低腹泻率,且本试验条件下高脂肪日粮对羔羊血液指标的影响皆在其自身调节的范围内。
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